Корзина
10 отзывов
E-MAIL: marketing@theseuslab.cz
+375 17 2374211

Импульсно-модулированные хлорофилл-флуориметры

Импульсно-модулированные хлорофилл-флуориметры
Модулированный хлорофилл-флуориметр использует сложную электронику, чтобы отделить флуоресценцию хлорофилла от окружающего света.

27.06.16

Модулированный хлорофилл-флуориметр использует сложную электронику, чтобы отделить флуоресценцию хлорофилла от окружающего света. На системном уровне это достигается с помощью применения быстро пульсирующего возбуждающего света, взывающего соответствующее импульсное излучение флуоресценции. Флуориметр использует высокочувствительный фотодиод для обнаружения и записи импульсного сигнала флуоресценции и игнорирует любые не импульсные сигналы.

При физиологических температурах пик излучения флуоресценции происходит в красной области спектра (685 нм) и простирается в область инфракрасного примерно до 800 нм (Krause и Weiss, 1984), как показано на рисунке ниже.

 


 
Точное измерение флуоресценции требует наличия системы обнаружения, которая чувствительна к длинам волн флуоресценции и не чувствительна к актиническому (или возбуждающему) свету, который влияет на фотохимию. 
В измерителях с непрерывным возбуждением, таких как Handy PEA и Pocket PEA, сигнал распознается с помощью применения специально созданных источников актиничного света длиной волны 650 нм для управления фотохимией; оптическая фильтрация детектора предотвращает обнаружение длин волн света не относящихся к флуоресценции. К сожалению, такие системы должны быть защищены от окружающего света во время применения, в противном случае красный/дальний красный компонент дневного света будет наложен на сигнал флуоресценции.

Эта проблема решается с помощью модулированного хлорофилл-флуориметра, так как он построен на применении электронного метода импульсной модуляции для разделения актинического света и сигнала флуоресценции (Ögren и Baker, 1985). Во время измерения образец ткани подвергается воздействию импульсного янтарного (или опционального синего) светодиодного источника света (модулирующего луча), который вызывает импульсный сигнал флуоресценции из образца в условиях исключения окружающего света. В условиях окружающего света система оптической фильтрации позволяет трем типам светового сигнала достичь детектора:

  • окружающий свет длин волн флуоресценции;
  • не импульсный сигнал флуоресценции от окружающего света;
  • импульсный сигнал флуоресценции, индуцированный модулирующего лучом.

Наличие окружающего света изменяет физиологию образца, изменяя доли энергии, которая переизлучается, как флуоресценция. Таким образом, величина пиков импульсного сигнала флуоресценции, индуцированного модулирующим пучком будет отражать изменения в физиологии образца. Именно пики этих быстрых сигналов отслеживаются, измеряются и усиливаются электроникой; сигналы флуоресценции от окружающего света и неимпульсные сигналы флуоресценции отбрасываются.

 

 

Диаграмма сверху показывает сигнал флуоресценции, обнаруженный модулированными хлорофилл флуориметрами FMS1 и FMS2. Диаграмма (A) – только в условиях модулирующего луча, (В) – при актиничном свете и моделированном луче до и после ( C ) быстрого отслеживания импульсов электроникой. Пульсирующая флуоресценция, индуцированная модулированным лучом, эффективно используется для исследования эффективности использования света для фотохимии фотосистемы II. Очень важно, что метод измерения сам по себе, не вызывает изменений в физиологии исследуемого образца.

Можно ожидать, что облучения образца мощным световым импульсом может внести значительные ошибки в измерения. Однако модулированные хлорофилл флуориметры Hansatech Instruments были специально разработаны, чтобы избежать таких проблем, с помощью применения импульсного модулирующего луча очень короткой длительности (1,8 мкс) с длинной паузой между импульсами. Конечным результатом является то, что создаваемое количество излучения, падающего на образец из модулирующего луча очень мало (около < 0,05 мкмоль м-2 с-1), чтобы вызвать значительные физиологические изменения в образце (Schreiber и соавт. 1986 *), но достаточно мощно, чтобы обеспечить надежный сигнал для флуоресцентного анализа.

Интерпретация сигналов флуоресценции значительно развилась с начала экспериментов Каутского и Хирша (1931) ** с применением нескольких методов для определения информации об эффективности фотосинтеза PSII (Baker 1991 ***). Модулированные хлорофилл-флуориметры компании Hansatech Instrument были разработаны, чтобы включить эти методы в простые процедуры, которые включают соответствующие измерения флуоресценции хлорофилла и автоматический расчёт ключевых параметров.

Предыдущие статьи
Контакты
  • Телефон:
    +375 (29) 640-41-26
    +375 (17) 237-42-11 доб. 418,
  • Контактное лицо:
    Дежурный специалист
  • Адрес:
    ул. Кропоткина, 91 а, Минск, 220020, Беларусь
Карта
social-icon
Loading...